漢坦病毒抗體檢測試劑盒（美國FOCUS）

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預期用途
此酶免試劑盒可用于流行性出血熱（EHF）病人血清中抗漢坦病毒IgG和IgM的定性檢測。
人流行性出血熱（EHF）檢測試劑盒。人流行性出血熱（EHF）檢測試劑盒。人流行性出血熱（EHF）檢測試劑盒。

前言簡介
流行性出血熱（EHF）又稱腎病綜合征出血熱（HFRS），是由漢坦病毒（Hantaan type）引起的。與流行性腎病相比（因近距離接觸普馬拉病毒而被傳染），HFRS的傳染性更嚴重，一般都會伴隨有尿毒癥、呼吸麻痹和伴隨有典型休克綜合癥的出血，甚至死亡。這種疾病起初的癥狀是流行性感冒樣癥狀。HFRS起初的典型癥狀是血小板減少癥和白細胞增多癥。漢坦病毒主要分布于亞洲和巴爾干各邦地區，通過直接接觸嚙齒動物、嚙齒動物的排泄物或分泌物而傳染給人。士兵、農民和露營者都特別容易受到危險。
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實驗原理
包被孔中包被了重組的漢灘型漢坦病毒核殼體蛋白。在檢測IgM抗體時，為了避免由IgG抗體或類風濕因子引起的非特異性因素的干擾，病人血清必須與類風濕因子IgG吸附劑一起孵育。
實驗過程孵育期間，抗重組漢坦病毒抗原的特異性抗體會結合到固相包被板上。洗板后，我們分別用過氧化酶標記的抗人IgG和IgM抗體檢測特異性的IgG和IgM。加入底物液后顯色，溶液所顯示的顏色強度與結合的抗體量成正比。之后用酶標儀讀取OD值。
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貯存及穩定性
試劑盒應當在2~8℃運輸和儲存，避免高溫和陽光直射，沒有打開的試劑能保存到有效期。包被條在封閉的袋子內2~8℃能保存到有效期。準備好的試劑的儲存及其穩定性在相應章節已闡明。
開封的微孔板密封放置2-8℃下可保存至有效期
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樣品采集和貯存

人血清

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試劑盒成分

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實驗做需器材但試劑盒沒提供

·         精確微移液管  體積（5; 20; 50; 100; 200; 1000 µL）

·         渦旋混合器

·         保溫箱, 37°C

·         試管（用于樣品稀釋）

·         8道微量移液器

·         洗瓶,自動或半自動洗板機

·         酶標儀

·         雙蒸水或去離子水

·         吸水紙,吸嘴,計時器

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實驗前準備
實驗前將試劑盒平衡至室溫（18-25°C）.含結晶的緩沖濃縮液可在37°C下迅速將其溶解.實驗前將其冷卻至至室溫（18-25°C）
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稀釋濃宿成分的準備（以測32孔為例）
提示:實驗前取所需量試劑,并迅速用于稀釋.

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樣品稀釋

提示:未稀釋樣品可于-20°C下保持數月
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實驗步驟
1將100μl即用型陽性質控、陰性質控、參考對照質控和稀釋血清樣品（如是IgM樣品,需用類風濕因子吸附劑前處理）加入到相應的微孔中。
2膠粘薄膜蓋板，37℃下溫育45分鐘。
3移除膠粘薄膜, 棄除孔內反應液.每孔加入300μl稀釋洗滌液，重復洗板4次，在吸水紙上拍干去除殘留液滴。
4每孔中加入100μl稀釋酶聯物（IgG 或IgM）
5膠粘薄膜蓋板。37℃下溫育45分鐘.
6移除膠粘薄膜, 棄除孔內反應液.每孔加入300μl稀釋洗滌液，重復洗板4次，在吸水紙上拍干去除殘留液滴。
7加底物液和終止液,建議用8道微移液器,保證加液相等的時間間隔。避免產生氣泡。
8每孔中加入100μl TMB底物液
9室溫（18-25°C）溫育10分鐘
10每孔中加入100μl終止液終止底物液反應。
1120分鐘內于酶標儀450nm處讀取OD值。（參考波長：650nm）
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8、結果計算
用病人樣品的OD值比上參考對照質控的OD值計算檢驗結果
A病人樣品/ A參考對照質控= Q

·         IgG抗體：

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·         IgM抗體：

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本譯文由廣州健侖生物科技有限公司技術人員編譯，僅供參考，請以英文原版說明書為準或與我們公司工作人員！

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漢坦病毒現狀 

       腎綜合征出血熱（以下簡稱出血熱）是由漢坦病毒引起的一種自然疫源性疾病，是《中華人民共和國傳染病防治法》規定的乙類傳染病。
       我國每年腎綜合征出血熱發病人數占世界報道的漢坦病毒感染病例的90%以上，是受漢坦病毒危害zui為嚴重的國家。我國大陸的31個省、市、自治區均有病例發生。我國年發病數zui高曾超過11萬，近十年來我國年報告發病人數一直在2～5萬左右，新疫區不斷出現，并時有暴發流行，老疫區的類型也有所變化。
     因此，開展腎綜合征出血熱的流行病學監測具有十分重要的意義，美國Focus公司進口原裝的腎綜合征出血熱ELISA試劑盒，已通過美國FDA認證、歐洲CE認證，可對出血熱調查及血清學檢測提供可靠的依據。